原核表达纯化的抗菌肽LL-37重组蛋白对小鼠外阴阴道假丝酵母菌病

　　目的

　　探讨原核表达纯化的抗菌肽LL-37重组蛋白对小鼠外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）的治疗作用。　　方法　　（1）雌性昆明小白鼠30只，经雌激素诱导并阴道内接种白假丝酵母菌悬液，构建VVC小鼠模型。建模成功后，按随机数字表法将小鼠随机分成实验组和对照组各15只，实验组小鼠阴道内灌注LL-37重组蛋白溶液30μl（100μg/ml，即3μg），每天1次，连续5d；对照组小鼠阴道内灌注等量磷酸盐缓冲液（PBS）。　　（2）阴道用药结束后24h，取两组小鼠的阴道灌洗液评估小鼠阴道内假丝酵母菌的载菌量［以菌落形成单位（CFU）表示］及假菌丝和芽生孢子的生成情况；摘取两组小鼠的阴道组织制备匀浆，ELISA法检测匀浆中免疫因子——白细胞介素10（IL-10）、γ干扰素（IFN-γ）的浓度。　　结果　　（1）本研究成功构建VVC小鼠模型，对照组小鼠阴道黏膜明显充血、水肿、阴道皱襞消失，实验组经LL-37重组蛋白治疗后阴道黏膜无明显水肿，阴道皱襞可见。　　（2）实验组小鼠阴道分泌物涂片中白假丝酵母菌的芽生孢子及假菌丝明显少于对照组。实验组小鼠阴道灌洗液中载菌量明显低于对照组［分别为（4.8±1.0）×104、（8.5±2.1）×104CFU/ml，P=0.017］；阴道组织匀浆中IFN-γ浓度明显高于对照组［分别为（257±11）、（197±4）pg/ml，P=0.000］，而IL-10浓度明显低于对照组［分别为（287±15）、（379±17）pg/ml，P=0.000］，且IFN-γ/IL-10比值明显高于对照组（分别为0.892±0.008、0.496±0.013，P=0.000）。　　结论　　原核表达纯化的LL-37重组蛋白可以抑制VVC小鼠阴道内假丝酵母菌的生长，调节阴道内IFN-γ、IL-10的分泌水平，改善阴道局部免疫力，对小鼠VVC有明显的治疗作用。　　关键词　　念珠菌病，外阴阴道；内源性抗菌多肽类物质；干扰素γ；白细胞介素10